佳木斯市實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀標(biāo)準(zhǔn)
發(fā)布時(shí)間：2022-04-16 01:39:43
佳木斯市實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀標(biāo)準(zhǔn)
布魯氏菌病：對(duì)種畜以外的牛羊進(jìn)行布魯氏菌病免疫，種畜禁止免疫。各省份根據(jù)評(píng)估情況，原則上以縣為單位確定本省份的免疫區(qū)和非免疫區(qū)。免疫區(qū)內(nèi)不實(shí)施免疫的、非免疫區(qū)實(shí)施免疫的，養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）應(yīng)逐級(jí)報(bào)省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門同意后實(shí)施。各省份根據(jù)評(píng)估結(jié)果，自行確定是否對(duì)奶畜免疫；確需免疫的，養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）應(yīng)逐級(jí)報(bào)省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門同意后實(shí)施。免疫區(qū)域劃分和奶畜免疫等標(biāo)準(zhǔn)由省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門確定。
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分子診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)和生物芯片技術(shù)。1.核酸分子雜交技術(shù) 具有一定互補(bǔ)序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則締合成異質(zhì)雙鏈的過(guò)程，稱為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測(cè)核酸序列和探針序列。應(yīng)用該技術(shù)可對(duì)特定DNA或RNA序列進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。2.聚合酶鏈反應(yīng)（即Polymerase chain reaction，PCR）原理：PCR是模板DNA，引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸（dNTP）在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應(yīng)，擴(kuò)增出所需目的DNA。包括三個(gè)基本步驟：雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈（變性）；在低溫下引物與單鏈DNA互補(bǔ)配對(duì)（退火）；在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術(shù)是近年發(fā)展起來(lái)的分子生物學(xué)與微電子技術(shù)相結(jié)合的核酸分析檢測(cè)技術(shù)。起初的生物芯片技術(shù)主要目標(biāo)是用于DNA序列測(cè)定、基因表達(dá)譜鑒定和基因突變體檢測(cè)和分析，所以又稱為DNA芯片或基因芯片技術(shù)。由于這一技術(shù)已擴(kuò)展至免疫反應(yīng)、受體結(jié)合等非核酸領(lǐng)域，出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片等，所以改稱生物芯片技術(shù)更符合發(fā)展趨勢(shì)。
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動(dòng)物防疫動(dòng)物疫病的預(yù)防、控制、撲滅及動(dòng)物和動(dòng)物產(chǎn)品的檢疫。狹義的動(dòng)物防疫，是為了預(yù)防某種動(dòng)物疫病，對(duì)所飼養(yǎng)的動(dòng)物進(jìn)行針對(duì)性地接種疫苗后，產(chǎn)生一種明顯針對(duì)該種疫病的免疫力，也就是通過(guò)打預(yù)防針而預(yù)防動(dòng)物疫病的發(fā)生。疫病預(yù)防指采取一切手段將某種傳染病排除在一個(gè)未受感染動(dòng)物群之外的防疫措施。通過(guò)多種隔離設(shè)施和檢疫措施阻止某種傳染病進(jìn)入一個(gè)尚未被污染的地區(qū)；或通過(guò)免疫接種、藥物預(yù)防和環(huán)境控制等措施，保護(hù)動(dòng)物免遭疫病危害。
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在PCR反應(yīng)早期，產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別，而后熒光的產(chǎn)生進(jìn)入指數(shù)期、線性期和終的平臺(tái)期，因此可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點(diǎn) 上來(lái)檢測(cè)PCR產(chǎn)物的量，并且由此來(lái)推斷模板初的含量。為了便于對(duì)所檢測(cè)樣本進(jìn)行比較，在real-time Q-PCR反應(yīng)的指數(shù)期，首先需設(shè)定一定熒光信號(hào)的域值，一般這個(gè)域值（threshold）是以PCR反應(yīng)的前15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)作為熒光本底信號(hào) （baseline），熒光域值的缺省設(shè)置是3～15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。如果檢測(cè)到熒光信號(hào)超過(guò)域值被認(rèn)為是真 正的信號(hào)，它可用于定義 樣本的域值循環(huán)數(shù)（Ct）。Ct值的含義是：每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的域值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。研究表明，每個(gè)模板的Ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的 對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系，起始拷貝數(shù)越多，Ct值越小。利用已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，因此只要獲得未知樣品的Ct值，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出該樣 品的起始拷貝數(shù)。
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常用的動(dòng)物檢疫方法:常用的動(dòng)物檢疫方法有臨床檢查、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)等方法。臨床檢查方法主要看動(dòng)物的表現(xiàn)(靜、動(dòng)、臥、起、立、精神、食欲等)是否正常，體溫、脈搏、呼吸等是否在正常生理指標(biāo)范圍內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)則依照農(nóng)業(yè)部頒布的動(dòng)物檢疫操作規(guī)程規(guī)定的檢疫方法和判定標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。①產(chǎn)地檢疫。是指動(dòng)物離開(kāi)飼養(yǎng)產(chǎn)地之前的檢疫。②屠宰檢疫。是指在宰前、宰后及屠宰過(guò)程中，對(duì)動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品所實(shí)施的檢疫。包括宰前檢疫②屠宰檢疫。是指在宰前、宰后及屠宰過(guò)程中，對(duì)動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品所實(shí)施的檢疫。包括宰前檢疫和宰后檢疫兩個(gè)環(huán)節(jié)。③檢疫證明。是指檢疫機(jī)關(guān)給檢疫合格的動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品出具的法律書證?，F(xiàn)行農(nóng)業(yè)部統(tǒng)一監(jiān)制、發(fā)放和使用的檢疫證明包括《動(dòng)物檢疫合格證明》、《動(dòng)物產(chǎn)品檢疫合格證明》、《出縣境動(dòng)物檢疫合格證明》、《出縣境動(dòng)物產(chǎn)品檢疫合格證明》和《動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品運(yùn)載工具消毒證明》5種。