天津?qū)崟r(shí)熒光定量PCR儀市場(chǎng)
發(fā)布時(shí)間:2025-08-16 00:51:39
天津?qū)崟r(shí)熒光定量PCR儀市場(chǎng)
分子診斷是指應(yīng)用分子生物學(xué)方法檢測(cè)患者體內(nèi)遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化而做出診斷的技術(shù)。分子診斷是預(yù)測(cè)診斷的主要方法,既可以進(jìn)行個(gè)體遺傳病的診斷,也可以進(jìn)行產(chǎn)前診斷。分子診斷主要是指編碼與疾病相關(guān)的各種結(jié)構(gòu)蛋白、酶、抗原抗體、免疫活性分子基因的檢測(cè)。合理的標(biāo)本采集對(duì)保證標(biāo)本的完整性和核酸的定性/定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性是至關(guān)重要的。標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格按照適當(dāng)?shù)纳锇?全指南進(jìn)行采集,不合適的標(biāo)本處理會(huì)導(dǎo)致核酸降解,產(chǎn)生錯(cuò)誤的患者檢測(cè)結(jié)果。

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化驗(yàn)室診斷方法采用的檢測(cè)依據(jù)有以下幾種:①國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)以及農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn);②動(dòng)物疫病檢測(cè)的其他規(guī)范:③化驗(yàn)室自行設(shè)定的檢測(cè)方法。不管采用何種方法,都需要考慮化驗(yàn)室自身的條件及樣品類型,如在對(duì)偽狂犬病進(jìn)行診斷時(shí),實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀,沒有基因擴(kuò)增儀,在診斷時(shí)檢測(cè)人員可采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行診斷。如果送檢樣品為血清,檢測(cè)人員則可以采用酶聯(lián)吸附試驗(yàn),而不需要采用動(dòng)物接種試驗(yàn)與病毒分離鑒定方法。

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分子診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)和生物芯片技術(shù)。1.核酸分子雜交技術(shù) 具有一定互補(bǔ)序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則締合成異質(zhì)雙鏈的過(guò)程,稱為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測(cè)核酸序列和探針序列。應(yīng)用該技術(shù)可對(duì)特定DNA或RNA序列進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。2.聚合酶鏈反應(yīng)(即Polymerase chain reaction,PCR)原理:PCR是模板DNA,引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸(dNTP)在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應(yīng),擴(kuò)增出所需目的DNA。包括三個(gè)基本步驟:雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈(變性);在低溫下引物與單鏈DNA互補(bǔ)配對(duì)(退火);在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術(shù)是近年發(fā)展起來(lái)的分子生物學(xué)與微電子技術(shù)相結(jié)合的核酸分析檢測(cè)技術(shù)。起初的生物芯片技術(shù)主要目標(biāo)是用于DNA序列測(cè)定、基因表達(dá)譜鑒定和基因突變體檢測(cè)和分析,所以又稱為DNA芯片或基因芯片技術(shù)。由于這一技術(shù)已擴(kuò)展至免疫反應(yīng)、受體結(jié)合等非核酸領(lǐng)域,出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片等,所以改稱生物芯片技術(shù)更符合發(fā)展趨勢(shì)。

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相對(duì)分子質(zhì)量為94的Taq DNA聚合酶的活性較高,大約為200000 U/mg,在合成DNA時(shí)有一個(gè)較高的適溫度75~80℃。Taq DNA聚合酶雖然在90℃以上合成DNA的能力有限,但高溫時(shí)仍比較穩(wěn)定。有實(shí)驗(yàn)證明,在92.5℃、95℃和97.5℃時(shí),PCR混合物中的Taq DNA聚合酶分別經(jīng)130 min、40 min和5~6 min后,仍可保持百分之50左右的活性,其半衰期較長(zhǎng)。所以,在一個(gè)PCR預(yù)備試驗(yàn)中,每次循環(huán)時(shí)上限溫度為95℃處理20S,則循環(huán)50次后Taq DNA聚合酶仍可保持百分之65的活性,能夠保證實(shí)驗(yàn)的需要。

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加強(qiáng)組織領(lǐng)導(dǎo)。地方各級(jí)人民政府對(duì)轄區(qū)內(nèi)動(dòng)物防疫工作負(fù)總責(zé),組織有關(guān)部門按照職責(zé)分工,落實(shí)強(qiáng)制免疫工作任務(wù)。省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門具體組織實(shí)施強(qiáng)制免疫,各級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)開展養(yǎng)殖環(huán)節(jié)強(qiáng)制免疫效果評(píng)價(jià),各級(jí)承擔(dān)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督職責(zé)的機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)監(jiān)督檢查養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)履行強(qiáng)制免疫義務(wù)情況。落實(shí)主體責(zé)任?!吨腥A人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法》規(guī)定,飼養(yǎng)動(dòng)物的單位和個(gè)人是免疫主體,承擔(dān)免疫責(zé)任。有關(guān)單位和個(gè)人應(yīng)自行開展免疫或向第三方服務(wù)主體購(gòu)買免疫服務(wù),對(duì)飼養(yǎng)動(dòng)物實(shí)施免疫接種,并按有關(guān)規(guī)定建立免疫檔案、加施畜禽標(biāo)識(shí),確??勺匪荨?/p>

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在動(dòng)物疫病診斷中,化驗(yàn)室的操作較為關(guān)鍵,對(duì)診斷的結(jié)果有直接的影響。但是,在當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室操作中還存在一-些問(wèn)題,如檢測(cè)操作中、檢測(cè)報(bào)告中未填寫、不開具《檢測(cè)委托書》等這些問(wèn)題的存在嚴(yán)重影響動(dòng)物疫病的診斷,不利于動(dòng)物疫病的防控。因此,在今后工作中,需要對(duì)相關(guān)工作制度進(jìn)行不斷地完善,促使化驗(yàn)室的操作更加規(guī)范化、科學(xué)化;加強(qiáng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員的專業(yè)培訓(xùn),提高其操作水平。只有這樣才能提高動(dòng)物疫病檢測(cè)的準(zhǔn)確性,為我國(guó)的動(dòng)物疫病防控工作做好鋪墊。