天津分子診斷試劑原材料應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2025-03-23 00:58:37
天津分子診斷試劑原材料應(yīng)用
分子診斷儀器主要包括核酸提取儀、PCR 擴(kuò)增儀、核酸分子雜交儀、基因芯片儀和基因測(cè)序儀等。在技術(shù)相對(duì)容易攻破的中端儀器領(lǐng)域,如核酸提取儀、PCR 擴(kuò)增儀、核酸分子雜交儀、基因芯片儀國(guó)產(chǎn)化已經(jīng)成型,國(guó)產(chǎn)產(chǎn)品占據(jù)了主要市場(chǎng),而 基因測(cè)序儀的國(guó)產(chǎn)化進(jìn)程正在發(fā)起突圍,主要表現(xiàn)為三種方式: (1)并購(gòu)國(guó)外的測(cè)序儀公司,在其核心技術(shù)的基礎(chǔ)上推出自主品牌的測(cè)序儀,以華大基因?yàn)榇怼#?)利用內(nèi)生科研能力自主研發(fā),以華因康基因、紫鑫藥業(yè)等公司為代表。(3)與國(guó)外知名測(cè)序儀生產(chǎn)企業(yè)合作,在其測(cè)序儀原型的基礎(chǔ)上加以改造,形成具有特殊用途的自主品牌的測(cè)序儀,代表公司是貝瑞和康、達(dá)安基因和博奧生物等。

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分子診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)和生物芯片技術(shù)。1.核酸分子雜交技術(shù) 具有一定互補(bǔ)序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則締合成異質(zhì)雙鏈的過(guò)程,稱為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測(cè)核酸序列和探針序列。應(yīng)用該技術(shù)可對(duì)特定DNA或RNA序列進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。2.聚合酶鏈反應(yīng)(即Polymerase chain reaction,PCR)原理:PCR是模板DNA,引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸(dNTP)在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應(yīng),擴(kuò)增出所需目的DNA。包括三個(gè)基本步驟:雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈(變性);在低溫下引物與單鏈DNA互補(bǔ)配對(duì)(退火);在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術(shù)是近年發(fā)展起來(lái)的分子生物學(xué)與微電子技術(shù)相結(jié)合的核酸分析檢測(cè)技術(shù)。起初的生物芯片技術(shù)主要目標(biāo)是用于DNA序列測(cè)定、基因表達(dá)譜鑒定和基因突變體檢測(cè)和分析,所以又稱為DNA芯片或基因芯片技術(shù)。由于這一技術(shù)已擴(kuò)展至免疫反應(yīng)、受體結(jié)合等非核酸領(lǐng)域,出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片等,所以改稱生物芯片技術(shù)更符合發(fā)展趨勢(shì)。

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高致病性禽流感:對(duì)全國(guó)所有雞、鴨、鵝、鵪鶉等人工飼養(yǎng)的禽類,根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況,在科學(xué)評(píng)估的基礎(chǔ)上選擇適宜疫苗,進(jìn)行H5亞型和(或)H7亞型高致病性禽流感免疫。對(duì)供研究和疫苗生產(chǎn)用的家禽、進(jìn)口國(guó)(地區(qū))明確要求不得實(shí)施高致病性禽流感免疫的出口家禽,以及因其他特殊原因不免疫的,有關(guān)養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)逐級(jí)報(bào)省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門同意后,可不實(shí)施免疫。

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Taq酶的酶動(dòng)力與擴(kuò)增效率有關(guān)。一般熱啟動(dòng)Taq酶的酶動(dòng)力越強(qiáng),PCR擴(kuò)增的指數(shù)增長(zhǎng)期越長(zhǎng),‘S型’曲線更加典型,熒光信號(hào)值更高,而且更適合做多重PCR檢測(cè)。我們?cè)容^過(guò)多家公司的熱啟動(dòng)Taq酶,在國(guó)外品牌中,英國(guó)Bioline公司的熱啟動(dòng)Taq酶,酶動(dòng)力較好,可做4重PCR,等量起始模板CT30時(shí)的熒光信號(hào)值高。在國(guó)內(nèi)品牌中,BIOG熱啟動(dòng)Taq酶的指數(shù)期較長(zhǎng),可做3重PCR,且擴(kuò)增曲線的‘S’型不受影響,其它的國(guó)產(chǎn)品牌一般只能支持2重反應(yīng),在做3重反應(yīng)時(shí),擴(kuò)增曲線低矮,熒光信號(hào)值較低,無(wú)典型擴(kuò)增曲線,結(jié)果很難判定。