齊齊哈爾市分子診斷試劑原材料檢測
發(fā)布時(shí)間：2025-01-29 01:00:37
齊齊哈爾市分子診斷試劑原材料檢測
分子診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)和生物芯片技術(shù)。1.核酸分子雜交技術(shù) 具有一定互補(bǔ)序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則締合成異質(zhì)雙鏈的過程，稱為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測核酸序列和探針序列。應(yīng)用該技術(shù)可對(duì)特定DNA或RNA序列進(jìn)行定性或定量檢測。2.聚合酶鏈反應(yīng)（即Polymerase chain reaction，PCR）原理：PCR是模板DNA，引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸（dNTP）在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應(yīng)，擴(kuò)增出所需目的DNA。包括三個(gè)基本步驟：雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈（變性）；在低溫下引物與單鏈DNA互補(bǔ)配對(duì)（退火）；在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術(shù)是近年發(fā)展起來的分子生物學(xué)與微電子技術(shù)相結(jié)合的核酸分析檢測技術(shù)。起初的生物芯片技術(shù)主要目標(biāo)是用于DNA序列測定、基因表達(dá)譜鑒定和基因突變體檢測和分析，所以又稱為DNA芯片或基因芯片技術(shù)。由于這一技術(shù)已擴(kuò)展至免疫反應(yīng)、受體結(jié)合等非核酸領(lǐng)域，出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片等，所以改稱生物芯片技術(shù)更符合發(fā)展趨勢。
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布魯氏菌病：對(duì)種畜以外的牛羊進(jìn)行布魯氏菌病免疫，種畜禁止免疫。各省份根據(jù)評(píng)估情況，原則上以縣為單位確定本省份的免疫區(qū)和非免疫區(qū)。免疫區(qū)內(nèi)不實(shí)施免疫的、非免疫區(qū)實(shí)施免疫的，養(yǎng)殖場（戶）應(yīng)逐級(jí)報(bào)省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門同意后實(shí)施。各省份根據(jù)評(píng)估結(jié)果，自行確定是否對(duì)奶畜免疫；確需免疫的，養(yǎng)殖場（戶）應(yīng)逐級(jí)報(bào)省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門同意后實(shí)施。免疫區(qū)域劃分和奶畜免疫等標(biāo)準(zhǔn)由省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門確定。
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在PCR反應(yīng)早期，產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別，而后熒光的產(chǎn)生進(jìn)入指數(shù)期、線性期和終的平臺(tái)期，因此可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點(diǎn) 上來檢測PCR產(chǎn)物的量，并且由此來推斷模板初的含量。為了便于對(duì)所檢測樣本進(jìn)行比較，在real-time Q-PCR反應(yīng)的指數(shù)期，首先需設(shè)定一定熒光信號(hào)的域值，一般這個(gè)域值（threshold）是以PCR反應(yīng)的前15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)作為熒光本底信號(hào) （baseline），熒光域值的缺省設(shè)置是3～15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。如果檢測到熒光信號(hào)超過域值被認(rèn)為是真 正的信號(hào)，它可用于定義 樣本的域值循環(huán)數(shù)（Ct）。Ct值的含義是：每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的域值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。研究表明，每個(gè)模板的Ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的 對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系，起始拷貝數(shù)越多，Ct值越小。利用已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，因此只要獲得未知樣品的Ct值，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出該樣 品的起始拷貝數(shù)。
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熱啟動(dòng)通過抑 制一種基本成分延遲DNA合成，直到PCR 儀達(dá)到變性溫度。延緩加入Taq DNA 聚合酶的手工熱啟動(dòng)方法十分煩瑣，尤其是對(duì)高通量應(yīng)用。其他熱啟動(dòng)方法使用蠟防護(hù)層將一種基本成分(鎂離子、酶、模板、緩沖液等) 隔離開。在熱循環(huán)時(shí)，蠟熔化把各種成分釋放出來并混在一起。蠟防護(hù)層法同樣比較煩瑣，易于污染，不適用于高通量應(yīng)用。
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加強(qiáng)組織領(lǐng)導(dǎo)。地方各級(jí)人民政府對(duì)轄區(qū)內(nèi)動(dòng)物防疫工作負(fù)總責(zé)，組織有關(guān)部門按照職責(zé)分工，落實(shí)強(qiáng)制免疫工作任務(wù)。省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門具體組織實(shí)施強(qiáng)制免疫，各級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)開展養(yǎng)殖環(huán)節(jié)強(qiáng)制免疫效果評(píng)價(jià)，各級(jí)承擔(dān)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督職責(zé)的機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)監(jiān)督檢查養(yǎng)殖場（戶）履行強(qiáng)制免疫義務(wù)情況。落實(shí)主體責(zé)任?！吨腥A人民共和國動(dòng)物防疫法》規(guī)定，飼養(yǎng)動(dòng)物的單位和個(gè)人是免疫主體，承擔(dān)免疫責(zé)任。有關(guān)單位和個(gè)人應(yīng)自行開展免疫或向第三方服務(wù)主體購買免疫服務(wù)，對(duì)飼養(yǎng)動(dòng)物實(shí)施免疫接種，并按有關(guān)規(guī)定建立免疫檔案、加施畜禽標(biāo)識(shí)，確保可追溯。